色譜柱作為液相色譜系統的核心部件，其性能直接影響分離效果。針對峰形拖尾和柱壓飆升兩大常見故障，以下提供系統性解決方案：
峰形拖尾的根源與對策
篩板堵塞
當色譜柱進出口篩板被顆粒物或鹽結晶堵塞時，樣品流動受阻導致延遲，形成拖尾峰。解決方案包括：
反沖色譜柱：使用甲醇或乙腈反向沖洗，逐步提高壓力至正常值。
更換篩板：若反沖無效，需拆卸色譜柱頭，用10%稀硝酸超聲清洗篩板10分鐘，再以純水超聲清洗后重裝。
預防措施：樣品需經0.22μm濾膜過濾，流動相現用現配并脫氣，避免高鹽溶液在柱頭結晶。
色譜柱塌陷或污染
柱頭塌陷：長期使用或流動相pH超標導致硅膠基質溶解，入口端填料缺失。需更換色譜柱，并控制流動相pH在2-9范圍內。
固定相污染：復雜樣品中的強保留物質（如蛋白質、脂質）積累在柱頭，導致峰形展寬?？刹捎糜袡C溶劑梯度洗脫1小時以上，或更換色譜柱。
樣品過載或溶劑不匹配
降低進樣量至3-50μg，或提高檢測器靈敏度。
樣品溶劑極性應與流動相一致，避免反相色譜中使用高比例乙腈作為樣品溶劑。
柱壓飆升的根源與對策
物理堵塞
鹽結晶：高鹽緩沖液在關機時析出，堵塞柱頭。用10%甲醇/水沖洗溶解鹽結晶，再換高濃度有機相。
顆粒物污染：樣品或流動相中的微粒堵塞篩板。需使用0.22μm濾膜過濾樣品，并安裝保護柱攔截污染物。
色譜柱損壞
填料塌陷：流速突變或高壓沖擊導致柱床壓實。需更換色譜柱，并避免流速驟變。
金屬污染：腐蝕性流動相溶解柱頭金屬濾片，沉積金屬離子。可用堿洗/酸洗再生填料，或更換色譜柱。
操作不當
保存不當：色譜柱長期閑置未保存于高比例有機相中，導致微生物滋生。需用乙腈-水-TFA（50:50:0.1）低流速過夜沖洗后密封保存。
溫度波動：柱溫過低增加流動相黏度，導致柱壓升高。使用柱溫箱控制溫度在40℃以下。
預防性維護建議
定期沖洗：每次分析后用甲醇沖洗色譜柱至基線平衡，避免鹽或強保留物質殘留。
使用保護柱：在分析柱前安裝短保護柱，攔截污染物并延長主柱壽命。
監(jiān)控柱壓：建立柱壓基線，若壓力升高超過10%需及時排查原因。
選擇合適填料：根據樣品性質選擇耐酸堿、耐高壓的填料（如C18-SH或聚合物填料）。
通過系統排查篩板狀態(tài)、流動相組成、樣品處理及操作規(guī)范，可顯著降低色譜柱故障率，延長其使用壽命至2年以上。
